桑椹发酵酒平板分离培养方法 时间：2012/12/26阅读：483 百科问答 共1个回答 2012/12/26 15:11:25小杰 （1）稀释分离：取数支无菌空试管排列于试管架上，根据待稀释的浓度分别依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，并向试管中各加入9mL无菌生理盐水。 用1mL无菌吸管吸取1mL已混匀的待测酒样，注入10-1试管中。然后，另取1支无菌吸管，于10-1试管中来回吹吸三次，使之混匀，即成10-1稀释液。再从10-1试管中吸1mL注入10-2试管中，重复上述操作，直至制成10-２、10-3、10-4、10-5稀释液。 （2）倾注平板：取无菌培养皿若干套，每3套为一组，在每组皿底分别写上稀释度，再用对应的1mL无菌吸管分别吸取10-1、10-2、10-3、10-4、10-5稀释液各1mL，对应放入编好号的无菌培养皿中，尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒入融化后冷却至45℃—50℃左右的培养基，每皿约15mL，置水平位置迅速旋转平皿，使培养基与菌液混合均匀，而又不使培养基荡出或溅到皿盖上，待培养基凝固。 （3）涂布平板：用对应的1mL无菌吸管分别吸取10-1、10-2、10-3、10-4、10-5稀释液各0.1mL，对应放入已编好号的预先制备好的空白平板中，迅速用无菌玻璃涂布棒（将玻璃涂布棒沾取酒精，在酒精灯火焰上灼烧，在培养皿上盖上冷却后使用）将稀释菌液均匀地涂抹在整个培养基的表面，至稀释液完全被吸收。 （4）培养：倒置于恒温培养箱中培养（用37℃，用30℃），观察菌落形态和分散状况，挑取单菌落转接斜面。 （5）计数：数各皿中的菌落数，算出同一稀释度3个平皿上菌落的平均数，按照计数报告原则计算结果。